Анализ кала на цисты и вегетативные формы простейших.

– это патогенный микроорганизм, способный вызывать серьезное заболевание, амебиаз, как у взрослых, так и у детей.

Среди простейших организмов самой примитивной считается амеба, имеющая микроскопические размеры (0,2-0,5 мм). Этот микроорганизм относится к простейшим одноклеточным животным; форма его тела все время меняется в зависимости от внешних условий.

У кишечной амебы (Entamoeba coli ) цикл существования очень прост. В благоприятной среде клетки развиваются, растут и делятся бесполым путем. При ухудшении условий существования они «замирают», образуя цисты.

Цисты представляют собой промежуточную стадию или же форму существования большинства микроорганизмов, во время которой они покрываются своеобразным защитным слоем, который позволяет микроорганизмам выживать даже без кислорода.

В природной среде цисты образуются преимущественно при чрезмерно высоких или низких температурах.

Например: амебы перестают питаться и размножаться осенью. С приходом холодов их тела округляются и покрываются толстой оболочкой – цистой. Тот же самый процесс происходит при осушении водоемов, рек и озер.

В организм человека или животного амебы попадают в форме цисты, которая защищена прочной двухслойной оболочкой. Заражение происходит через продукты питания (плохо вымытые фрукты и овощи), зараженную воду, грязные руки.

Попадая в организм человека, животного, в водоемы или влажную почву, микроорганизмы оживают, высвобождаются из защитной оболочки и начинают активно размножаться.

Если цисты попадают в организм человека со слабой иммунной системой и нарушенной микрофлорой кишечника, дизентерийные амебы начинает вести себя агрессивно и начинает развиваться (дизентерийной амебный колит, амебная дизентерия).

Для кишечного амебиаза характерны обильный понос с прожилками крови, слизи и гноя. По мере развития болезни нарастают и негативные проявления в виде повышения температуры тела, озноба, рвоты, потери аппетита. Во время дефекации возможны схваткообразные боли внизу живота, которые в спокойном состоянии менее выражены.

Не стоит забывать о том, что различные цисты способны передаваться не только через грязные руки или зараженные продукты питания, но и половым и бытовым путем.

Путешествия в жаркие экзотические страны также опасны в плане заражения простейшими.

При благоприятных условиях мелкие вегетативные формы переходят в крупные патогенные, которые и вызывают образование язв. Погружаясь в глубину тканей, они переходят в тканевые формы, которые в особо тяжелых случаях проникают в кровоток и разносятся по организму.

Большинство из них обусловлено гематогенной диссеминацией – распространением с кровотоком микроорганизмов из толстых кишок. В большинстве своем амебные абсцессы являются результатом кишечной инвазии, но по своей клинике – это самостоятельные болезни, требующие «своего» лечения.

Кишечный амебиаз у взрослых и детей – наиболее распространенный вид болезни, вызываемой дизентерийной амебой.

Непатогенная форма

Существует, однако, и непатогенная форма. Цисты проглатываются человеком и попадают в толстый кишечник, где из них образуется просветная непатогенная форма. В это время человек не болеет, а является всего лишь носителем болезни (цистоносителем).

Часть просветных амеб трансформируется в цисты, которые выводятся вместе с фекалиями наружу и являются источником заражения. Другая часть пребывает в неизменном состоянии или, воспользовавшись ослаблением иммунитета хозяина, превращается в патогенную Forma magna, запуская процесс болезни.

Вегетативная форма амебы в кале

В жизненном цикле гистолитической (дизентерийной) амебы различают вегетативную (трофозоит), пред-цистную и цистную стадии развития. В отличие от других видов амеб у гистолитической амебы выделяют две формы вегетативной стадии: тканевую (forma magna ) и просветную (forma minuta ). Тканевая форма (эритрофаг) патогенна.

Жизненный цикл гистолитической амебы

Вегетативные формы гистолитической амебы остаются в кале жизнеспособными в течение 15-30 мин. При температуре + 2… +6°С и относительной влажности воздуха 80- 100% цисты выживают на объектах из стекла, металлов, полимеров и других материалов до 12-25 суток, а при температуре +18… +27°С и относительной влажности воздуха 40-65% - не более 7 часов.

Цисты отличаются высокой устойчивостью к факторам внешней среды. В кале при температуре +13… + 24°С они остаются живыми от 3 до 15 суток, а при -1… -21°С - от 17 до 111 суток. Выделение цист инвазированными лицами может продолжаться многие годы, а за сутки один носитель способен выделять с фекалиями 300 миллионов и более цист.

В охлажденных пищевых продуктах, на фруктах, овощах, предметах домашнего обихода цисты способны сохраняться несколько дней. Губительное действие на цисты оказывает высокая температура.

Воздействие низких температур (–20 °С) цисты переносят несколько месяцев. Высушивание губит цисты почти мгновенно.

Цисты кишечной амебы в кале

Цисты гистолитической амебы образуются путем последовательных превращений из просветной формы, когда она, продвигаясь с фекалиями под влиянием неблагоприятных факторов (изменение рН фекалий и развитие гнилостных процессов), переходит в предцистную форму, а затем в цисту.

Диаметр цист колеблется в пределах от 8 до 16 мкм, они имеют правильную сферическую форму и окружены бесцветной оболочкой. Зрелая циста содержит 4 ядра, а в протоплазме ее находится вакуоль, наполненная гликогеном.

При попадании цист в тонкую кишку человека происходит разрушение их оболочек, и из них выходит 4-ядерная материнская форма амебы, при делении которой образуются 8 одноядерных амеб. При благоприятных условиях они размножаются, превращаясь в вегетативные формы, которые обитают в проксимальных отделах толстой кишки.

Циста под микроскопом в кале

Распознавание болезни основывается на эпидемиологических данных и клинической картине с использованием ректороманоскопии. Подтверждением диагноза служит обнаружение под микроскопом тканевых форм в мокроте, содержимом абсцессов, материале из дна язв, обнаружение большой вегетативной формы амебы в испражнениях. Выявление просветных форм и цист амеб в кале недостаточно для окончательного диагноза.

Для постановки диагноза применяют множество методов, одним из них является исследование кала на цисты простейших. Для обнаружения простейших в испражнениях пациента используется метод микроскопического исследования. В день сдачи анализа нельзя принимать препараты, особенно – слабительные, а также делать клизмы. Материал для исследования должен быть максимально свежим и «чистым».

Взрослые особи в кале не выживают, так как они практически сразу погибают и мгновенно разлагаются под воздействием условий внешней среды.

Возможно, первый анализ покажет у человека ложноотрицательный результат, поскольку само инфицирование носит волнообразный характер.

То есть, в различные периоды течения болезни наблюдается меньшее или большее количество цист в биологическом материале, а иногда их может не быть вообще. Поэтому намного целесообразнее сдавать несколько промежуточных анализов.

Анализ на наличие простейших – исследование под микроскопом окрашенных мазков кала с целью выявления одноклеточных микроорганизмов. Простейшие имеют достаточно сложный индивидуальный цикл развития, включающий несколько стадий и форм. Одним видам требуется другой организм (помимо человека), чтобы завершить цикл развития, другим – определенные условия внешней среды (вода, воздух, почва).

В кале могут обнаруживаться не только половозрелые формы, иначе именуемые вегетативными, но и цисты.

Циста – особая стадия покоя, находясь в которой, простейшие не размножаются и не питаются, но представляют потенциальную опасность для человека.

Чаще всего исследование назначает врач-инфекционист или (для детей) педиатр. Терапевты и врачи общей практики назначают анализ в рамках оформления медицинских книжек и справок, в качестве пропускного анализа при госпитализации пациента в стационар.

Не всегда отрицательный результат свидетельствует об отсутствии простейших в кале. Это происходит при малом их количестве в исследуемом образце, а также при несовпадении периода выделения простейших в кал с моментом взятия анализа, что напрямую зависит от жизненного цикла микроорганизма. При явной клинической симптоматике и отрицательных результатах анализа рекомендуется сдать кал повторно через неделю.

Амебы в кале у кошек и собак

Определяются патогенные простейшие, в том числе и амебы, в оформленном кале кошек и собак в виде цист. Для обнаружения вегетативных форм необходимо исследовать кал еще в теплом состоянии. Нужно учитывать, что в коле могут встречаться непатогенные простейшие, которые нужно дифференцировать от патогенных.

При исследовании кала концентрационными флотационными методами обнаруживают маленькие цисты, нахождение которых позволяет проводить дифференциальную диагностику. При окраске мазка гематоксиленом обнаруживают типичные 4-ядерные цисты. Ядра выделяются и при добавлении капли раствора Люголя к исследуемому образцу.

При подозрении на амебную дизентерию у домашних животных необходимо проконсультироваться о результатах исследований с ветеринаром, который сможет отличить патогенных от непатогенных форм амеб.

Сейчас действует скидка. Препарат можно получить за 197 руб.

В кале можно обнаружить множество видов одноклеточных. Место их дислокации в основном кишечник. Обнаружить можно цисты простейших следующих классов:

1. Жгутиковых
2. Амебных
3. Кокцидийных
4. Реснитчатых
5. Амебиаз

Это заболевание вызывает простейшее – дизентерийная амеба. Это одноклеточное локализуется в толстом кишечнике и выделяется в виде трофизоита или цисты. Большинство амеб не являются патогенными, к ним относятся: кишечная, Бючли, Гартмана. Обнаружить их в кале довольно сложно. Цисту дизентерийной амебы диагностировать проще. Ее присутствие в кале свидетельствует о наличии у человека язвенного или дизентерийного колита. Подозрение на наличие в организме амеб может возникнуть в связи:

• Со слабостью
• Прожилками крови в кале

Заболевание при несвоевременности лечения может принять хроническое течение.

В кале обнаруживают следующие формы амеб:

• Тканевую
• Просветную
• Инцистированную

1. Перитонит
2. Опухолевое новообразование
3. Абсцесс кишечника
4. из заднего прохода

• Увеличение печени
• Кровь и слизь в кале
• Резкое снижение веса

Иногда балантидии обнаруживают в кале в виде цист даже у здоровых людей.

Лямблиоз

• Потерей веса
• Вздутием
• Отсутствием аппетита
• Пенистым стулом
• Кожными высыпаниями

Лямблии поражают кишечник механически и блокируют его слизистую, что вредит пищеварению. Пища в кишечнике не может перевариться, и ее остатки начинают гнить. Вследствие этого происходит образование множества бактерий. Приводит это к заболеваниям желчевыводящих путей, желчного пузыря и .

1. Холецестит
2. Склерозирующий холангит
3. Анализ на цисты простейших

Для обнаружения некоторых видов простейших для окрашивания стекла применяются , приготовленные по Грамму. В некоторых случаях метод малоэффективен в отношении некоторых простейших, например, криптоспоридий. Их цисты слабо способны удерживать окраску и их часто путают с дрожжеподобными грибами. В этом случае применяется окраска на кислотность. В этом растворе цисты криптоспродий окрашиваются в розовый или красный цвет, другие микроорганизмы, реагируя на этот раствор, принимают фиолетовый оттенок.

С целью контроля лечения исследование организма на наличие цист простейших проводится в зависимости от заболевания:

• У больных амебиозом и балантидиазом – на следующие сутки после лечения
• У больных лямблиозом спустя неделю

Подготовка к анализу

Накануне анализа нужно исключить прием слабительных средств и продуктов, вызывающих разжижение стула. Не следует в течение двух суток до анализа применять , масла и лекарственные препараты для стимуляции перистальтики кишечника. Не принимать в пищу красящие продукты и лекарства.

Цели исследования

Исследование кала на содержание цист простейших проводится с целью:

Лечение балантидиаза

Балантидиаз лечится двумя курсами по пять дней. Назначают Миомицин и Окситетрациклин 4 раза в течение суток. Прогноз при своевременном лечении благоприятный.

Лечение амебиоза

Амебиоз лечат в зависимости от вида заражения, состояния слизистых тканей и органов. Для лечения инвазивного Амебиоза применяют 5 Нитроимидазолы:

• Секнидозол
• Метронидозол
• Трихопол
• Орнидазол
• Фасижин

Эти препараты применяются для лечения кишечного амебиоза и для абсцессов любой формы. Больным амебной дизентерией, у которых заболевание протекает в тяжелой форме, помимо перечисленных назначают антибактериальные препараты, чтобы избежать возникновения гнойных абсцессов. При образовании абсцессов проводят его дренирование через кожу (аспирацию). На сегодняшний день амебиоз может быть излечен полностью, если вовремя начать его терапию. А для этого нужна ранняя диагностика и правильно выбранное лечение.

Циста (cista) – это промежуточная стадия или же форма существования большинства микроорганизмов, во время которой они покрываются своеобразной защитной оболочкой. Процесс цистообразования запускается в тот момент, когда простейший организм попадает в неблагоприятные условия. Оболочка временно «замораживает» обмен веществ.

Что такое циста в биологии?

Образование цисты – инцистирование. Подобная форма жизни является временной. С точки зрения биологии, она необходима для размножения и для защиты конкретной популяции от вымирания.

Некоторые простейшие организмы при определённых обстоятельствах могут находиться в цистообразном состоянии сотни лет.

Существует 3 формы цисты:

Циста – это защитный слой, позволяющий микроорганизмам выживать даже без кислорода. Внешний вид цист можно рассмотреть на фото на примере лямблий. Они выглядят как микроскопические зерна овальной формы с двумя ядрами по бокам.

Неклеточная форма жизни (бактериофаги, вирусы) не инцистируется.

Циста – образование защитной оболочки вокруг микроорганизма

Условия образования цист

В природной среде цисты образуются преимущественно при чрезмерно высоких или низких температурах. Например, амёбы перестают питаться и размножаться осенью. С приходом холодов их тела округляются и покрываются толстой оболочкой – цистой. Тот же самый процесс происходит при иссушении рек и озёр.

Церкарии печёночного сосальщика инцистируются, как только попадают в траву вместе с калом домашних животных (преимущественно – кошек). Впоследствии крупный рогатый скот поедает цисты вместе с зеленью. Такой процесс транспортировки гельминтов является наиболее распространённым.

Анализ на цисты

Патогенные микроорганизмы намного легче обнаружить, если они находятся в оболочке. Для анализов потребуется биологический материал – кал. Взрослые особи в кале не выживают, так как они практически сразу погибают и мгновенно разлагаются под воздействием условий внешней среды.

Возможно, первый анализ покажет у человека ложноотрицательный результат, поскольку само инфицирование носит волнообразный характер. То есть, в различные периоды течения болезни наблюдается меньшее или большее количество цист в биологическом материале, а иногда их может не быть вообще. Поэтому намного целесообразнее сдавать несколько промежуточных анализов.

Для обнаружения простейших в испражнениях пациента используется метод микроскопического исследования. В день сдачи анализа нельзя принимать препараты, особенно слабительные, а также делать клизмы. Материал для исследования должен быть максимально свежим и «чистым».

Цистные формы, которые можно найти в каловых массах:

• реснички (реснитчатые);
• споровые;
• корненожки;
• инфузории;
• жгутики (жгутиковые)
• кишечные кокцидии (криптоспоридии).

.

Наиболее распространённые патогенные микроорганизмы, встречающиеся в цистовой форме: Entamoeba coli (энтамёба коли, кишечная амёба), Chilomastix mesnili (хиломастикс), Lamblia intestinalis (лямблия), Entamoeba histolytica (дизентерийная амёба).

Дизентерийная амёба в цистовой форме

Нужно ли лечить?

Практически у всех здоровых людей в кишечнике находятся блацисты. При неблагоприятных условиях эти простейшие организмы преобразуются в цисты. Блацисты являются условно патогенными, поэтому у некоторых людей они могут вызвать появление заболевания – бластоцистоза. Но в большинстве случаев данные микроорганизмы никакого вреда не наносят.

Обычно у заражённого человека проявляется симптоматика, выражающаяся общей интоксикацией организма. Поэтому пациент сам чувствует, когда ему требуется сходить к врачу и сдать анализы. Также характерным признаком является наличие небольших точек в каловых массах.

Многие специалисты считают, что организм взрослого человека и даже ребёнка способен справиться с простейшими без дополнительного лечения.

У ребёнка во время общего обследования могут найти бессимптомный лямблиоз. Это будет свидетельствовать о том, что он является носителем заболевания и потенциально опасен для детского коллектива. Поэтому в садик больного ребёнка не возьмут, пока он полностью не вылечится.

Лечение

• подготовка;
• приём основных медикаментов;
• реабилитация.

При неполной или неправильной терапии заболевание возобновится, поэтому к лечению нужно отнестись серьёзно.

Подготовительный этап

На данном этапе пациент должен выполнять следующие врачебные рекомендации:

1. Соблюдать строгую диету. Следует насытить рацион кашами, злаками, овощами, фруктами и сложными углеводами. Нельзя употреблять: спиртные напитки, газировку, сладости, жирную пищу.
2. Принимать очищающие средства. Подойдут лекарственные сборы, а также энтеросорбенты (Смекта, активированный уголь). Взрослым пациентам рекомендуется раз в неделю устраивать разгрузочный день. Всё это поможет очистить организм от токсинов, образовавшихся на фоне жизнедеятельностb патогенных микроорганизмов.
3. Поддерживать чистоту. Нужно регулярно стирать одежду и постельное бельё, мыть руки после улицы и обрабатывать еду. Многие пациенты после терапии повторно заражаются цистами из-за несоблюдения личной гигиены в процессе лечения.

При необходимости на этом этапе можно принимать лекарства, снимающие симптоматику болезни. Это могут быть желчегонные или противоаллергические препараты.

Медикаментозное лечение

На данном этапе к терапии подключаются препараты, выводящие простейших из организма. Выбор лекарства зависит от типа возбудителя инфекционной болезни. Наиболее часто для лечения применяются такие медикаменты, как:

1. Трихопол. Выпускается в форме таблеток и свечей. Лекарство до недавнего времени использовалось только для лечения трихомонадных инфекций (возбудитель: трихомонада). Сейчас препарат также применяют для терапии лямблиоза, хеликобактериоза (возбудитель – бактерия Helicobacter pylori), амёбиаза. Медикамент запрещён к применению детям младше 3 лет. Суточная доза для детей до 10 лет: 125 мг 2 раза в день (курс лечения: неделя). Для взрослых пациентов и детей старше 10 лет: 500 мг 2 раза в день в течение недели. Стоимость 20 таблеток: от 130 рублей.
2. Азитромицин. Полусинтетический антибиотик, выпускается в форме таблеток и капсул. Лекарство применяется для лечения анаэробных инфекций, воспалительно-инфекционных патологий. Препарат разрешён к применению детям. Суточная дозировка: 5 мг на 1 кг (для детей), 0,5 г на 1 кг (для взрослых). Курс лечения: 5 суток. Цена таблеток: от 120 рублей.
3. Орнидазол. Выпускается в форме таблеток. Медикамент применяется для терапии амёбиаза, трихомониаза, лямблиоза. Также препарат используется для профилактики анаэробных инфекций. Лекарство запрещено к применению детям, масса тела которых менее 12 кг. Суточная доза для детей до 12 лет: 1 г (разделить на два приёма). Курс лечения: неделя. Дозировка для взрослых и детей старше 12 лет: от 1,5 до 2 г в сутки (суточная норма зависит от массы тела пациента). Курс лечения: 2–4 дня. Стоимость лекарства: от 150 рублей.

Выбирать и принимать препараты нужно очень осторожно, поскольку все они имеют массу побочных эффектов и противопоказаний. Терапевтические средства для беременных и кормящих женщин подбираются врачом в индивидуальном порядке.

Реабилитация

Не стоит забывать о том, что различные цисты способны передаваться половым и бытовым путём. Не существует профилактических методов, способных на 100% оградить человека от этого неприятного явления. Поэтому стоит соблюдать элементарные правила гигиены, чтобы не допустить заражения.

Исследование кала на простейшие - это универсальный метод диагностики кишечных протозоонозов при эпидемиологических и диагностических осмотрах населения. Используется для выявления наличия цист и ооцист простейших кишечника.

Простейшие кишечника принадлежат к типу Protozoa. Характерной особенностью этого типа является то, что на всех этапах жизненного цикла они существуют в виде одной клетки. В жизненном цикле проходят две стадии: вегетативную – стадию трофозоида (активную, подвижную, размножающуюся, питающуюся) и стабильную стадию – цисты.

Обнаружение и дифференцирование про­стейших - один из наиболее сложных разделов исследования испражнений. Отличие патоген­ных форм простейших от непатогенных требует известного опыта и тщательности в работе.

Здесь следует учитывать, что большинство этих одноклеточных организмов встречается в двух формах: вегетатив­ной - активной, подвижной, жизнедеятельной, легко поддающейся вредным воздействиям (в частности, охлаждению) и потому быстро поги­бающей после выделения из кишечника, и в виде устойчивых к внешним воздействиям цист. Существование вегетативных форм требует более или менее жидкой среды, поэтому они обнаруживаются преимущественно в жидком, полужидком, слизистом кале. При неблаго­приятных условиях для их жизнедеятельности (например, уплотнение каловых масс) они пре­вращаются в цисты. В оформленном кале простейшие, как правило, встречаются лишь в инцистированном состоянии.

Кал для отыскания в нем вегетативных форм должен исследоваться сразу после его выделе­ния, еще в теплом состоянии. Необходимость этого вызывается двумя причинами. Во-первых, в остывшем кале вегетативные формы простей­ших быстро гибнут и мертвыми быстро под­даются действию протеолитических ферментов. Вследствие этого они сначала теряют характер­ные особенности своей структуры, позволяющие отличать патогенные формы от непатогенных, а затем и совсем растворяются. Во-вторых, при остывании уменьшается, а затем исчезает по­движность простейших - важный вспомога­тельный фактор при их дифференцировании.

Следует заметить, что сохранение кала в термостате не допускается, так как в условиях искусственного подогревания простейшие очень быстро подвергаются дегенеративным измене­ниям, затрудняющим их распознавание.

В оформленном кале, как правило, встре­чаются только цисты, однако в комках слизи, находящихся на его поверхности, иногда можно найти и вегетативные формы. Поэтому опреде­ление вегетативных форм простейших, находя­щихся в слизи, следует производить по возмож­ности быстро.

Иногда для обнаружения простейших, особенно амеб, используют материал, получен­ный при ректороманоскопии. В этих случаях особенно нужно помнить о необходимости пра­вильного обращения с полученным незначитель­ным количеством материала. За время транспорти­ровки в лабораторию, расположенную даже в том же здании, эта капля успевает остыть, а иногда и высохнуть. Поэтому лучше всего под­готовить все необходимое для исследования в том же помещении, где проводится эндоскопия. Смазывания ректоскопа вазелиновым маслом или жиром делают последующую микроскопию затруднительной.

Для обнаружения в кале простейших прибе­гают к ряду методов. Трудности, сопряженные с обнаружением цист простейших, могут быть в известной степени преодолены путем примене­ния методов концентрации. Культивирование простейших и заражение ими животных, приме­няемые в основном с научными целями, ввиду сложности методики малопригодны в повседнев­ной практической работе. Выделение простей­ших с калом происходит непостоянно. Поэтому не следует ограничиваться при их поисках однократным исследованием. Последнее нужно повторить 4-5 раз через 2-3 дня.

Унифицированные методы определения про­стейших с помощью нативного мазка н мазка с раствором Люголя.

Принцип. Движущиеся простейшие обнаруживаются при исследовании суспензии каловых масс в изото­ническом растворе хлорида натрия с помощью микроскопа. Препарат в этом растворе служит прежде всего для выявления вегетативных форм простейших, которые распознаются по характе­ру движения. Препарат суспензии каловых масс в растворе Люголя в основном используют для дифференцирования цист простейших.

Оценка результатов. Исследуют 2-3 препарата, отмечая всех замеченных про­стейших. В сомнительных случаях или при полу­чении отрицательного результата анализ повто­ряют; на протяжении 1-2 нед проводят не менее 3 анализов. Метод позволяет наряду с непатогенными простейшими выявить Enta­moeba histolitica и Balantidium coli, а также условно-патогенную Lamblia intestinalis.

Унифицированный метод с применением консервантов.

Принцип. Простейшие фиксируются в каловых массах консервирую­щим раствором, поэтому морфологические приз­наки простейших длительное время остаются без изменений.

Оценка результатов. Исследуют 2-3 препарата, отмечая всех обнаруженных простейших. Структуры простейших при приме­нении консервантов окрашиваются в синий цвет красителем. Внутренняя структура балантидиев в консервированном материале стано­вится незаметной, и балантидиев обнаруживают лишь по войлокообразному слою ресничек по периферии клетки.

Унифицированный метод формалин-эфирного обогащения.

Принцип. Формалин-эфирная обработка позволяет выделять и кон­центрировать цисты простейших.

Оценка результатов. При исследо­вании препарата отмечают всех обнаруженных простейших. Метод позволяет выявить цистные их формы. Основные формы простейших пред­ставлены ниже.

Класс корненожек (Shizopoda)

К классу корненожек относятся амебы. Характерной осо­бенностью вегетативной стадии этого одно­клеточного организма является отсутствие оболочки, вследствие чего тело не имеет постоян­ной формы. При неблагоприятных условиях тело амебы покрывается оболочкой и она превра­щается в цисту - устойчивую форму, способную сохранять жизнеспособность вне организма человека. В цисте ядро делится на 2-4-8 частей. Попав в кишечник человека, циста под влиянием пищеварительных ферментов осво­бождается от своей оболочки. Протоплазма ее делится с образованием одноядерных вегетатив­ных особей, количество которых соответствует числу ядер цисты.

Главная задача, возникающая при обнару­жении амеб,- различить патогенную дизенте­рийную от непатогенных форм. Поэтому лабора­торный работник должен быть знаком с морфо­логическими особенностями этих видов простейших.

Entamoeba histolytica.

В свежем нативном препарате дизентерийная амеба имеет вид почти бесцветного неопределенной формы комочка. Ядра в ней не видно. Протоплазма ясно делится на зоны: наружную - гомогенную эктоплазму и внутреннюю - эндоплазму. Первая примерно в 2 раза меньше второй.

При движении амебы псевдоподии возни­кают из эктоплазмы, а затем в образовавшееся выпячивание постепенно вливается эндоплазма. Характер движения является одной из типичней­ших особенностей дизентерийной амебы. Псевдо­подия выбрасывается ею мгновенно, а при перемещении в нее эндоплазмы движение стано­вится поступательным. Все это отличает дизентерийную амебу от кишечной, у которой нет деления на эндо- и эктоплазму; форма меняется очень медленно, и при образовании псевдоподий тело не перемещается в пространстве.

Е. histolytica встречается в кишечнике в двух формах: тканевой и просветной. Тканевая фор­ма, называемая также Е.histolytica forma mag­na, получила свое название вследствие того, что она проникает в ткани хозяина и, поселяясь там, вызывает изъязвление стенки кишечника. Ее встречают в кале при остром амебиазе. Размер этой амебы колеблется в значительных пределах (от 16 до 60 мкм). В состоянии покоя, когда форма тела приближается к округлой, размер ее 20-30 мкм, а в вытянутом состоянии длина может быть в 2 раза больше. Наличие в протоплазме амеб эритроцитов является очень важным диагностическим признаком, так как непатогеиные формы никогда их не содер­жат. Бактерии в протоплазме живой тканевой формы встречаются как исключение. Обычно они проникают в тело амебы только после ее гибели. Просветная форма, или Е.histolytica forma minuta, обитает в просвете кишечника (отсюда и ее название). В стенку кишечника она не внедряется, поэтому не вызывает ее изъязвления и соответствующей клинической картины. Про­светная форма амебы обнаруживается у лиц, выздоравливающих от острого амебиаза, у стра­дающих хронической формой заболевания и у носителей.

Отличия просветной формы от тканевой следующие: она меньше размером - обычно 12-25 мкм, изредка еще меньше. Движение совершается более медленно, хотя иногда наблюдается выбрасывание псевдоподий. В про­топлазме эритроцитов нет и содержится небольшое количество бактерий.

Цисты Е. histolytica правильной круглой формы, бесцветны, диаметр их в среднем 10- 12 мкм. Протоплазма слегка зерниста, ядра (1-4) без окраски плохо различимы. В некото­рых цистах можно заметить хроматоидные тела - короткие, бесцветные, сильно преломляю­щие свет палочки с закругленными концами, которым приписывается роль запасного пита­тельного материала. Эритроцитов цисты никогда не содержат.

В препарате, окрашенном раствором Люго­ля, можно обнаружить у цисты ясно различи­мую двухконтурную оболочку, ядра и гликогеновую вакуоль. Ядра выглядят как колечки, в центре которых в виде блестящей точки распо­ложена кариосома. Зрелая циста содержит 4 ядра. Хроматоидные тела не окрашиваются йодом.

Наиболее характерным признаком дизенте­рийной амебы является строение ее ядра. Оно имеет округлую форму с диаметром 3-8 мкм и располагается в эндоплазме эксцентрично. В центре ядра находится округлая или много­угольная, правильной формы, около 0,5 мкм в поперечнике, кариосома, окруженная светлой зоной. Пространство между кариосомой и обо­лочкой не содержит никаких зерен. Дизенте­рийную амебу необходимо отличать от обнару­живаемых в кишечнике непатогенных форм.

Entamoeba hartmanni - непатогенная аме­ба, имеющая наибольшее сходство с E.hisiolytica в строении тела, но отличающаяся значительно меньшей величиной. Вегетативные формы ее имеют размер от 5 до 12 мкм. Размер 4-ядерных цист - от 5 до 10 мкм. Движения ее совер­шаются медленно, эритроцитов она не фаго­цитирует.

Entamoeba coli - наиболее часто встречаю­щийся в кишечнике вид амеб. В нативном препа­рате вегетативная форма имеет размер 29-30 мкм в округлившемся состоянии и до 60 мкм в вытянувшемся. В протоплазме нет деления на эндо- и эктоплазму, она не содержит эритро­цитов. В больших щелевидных вакуолях имеется значительное количество разнообразных вклю­чений: бактерии, грибы, лейкоциты, крахмальные зерна, цисты других простейших. Движения медленные, не имеют поступательного характе­ра. В отличие от Е.histolytica ядро заметно и в нативном и еще лучше в окрашенном йодом препарате. Цисты E.coli круглой формы, крупнее цист дизентерийной амебы: их диаметр в сред­нем около 19-20 мкм. Двухконтурная оболочка толще, чем у Е. histolytica. Ядер от 1 до 8, они могут быть заметны и в неокрашенных препаратах, но лучше видны после окраски йодом.

Стадия 4-ядерной цисты очень кратковре- менна и поэтому наблюдается редко в отличие от Е. histolytica; нахождение 8-ядерных цист подтверждает их принадлежность к виду Е. coli. В связи с тем что ядра лежат в разных плоско­стях сферического тела цисты, то увидеть и правильно подсчитать их можно только, работая микрометрическим винтом. При окраске йодом можно заметить в ядре кариосому, а в прото­плазме незрелых (I-2-ядерных) цист - боль­шую гликогеновую вакуоль.

Endolimax nana - непатогенная амеба ма­лого размера (в среднем около 7 мкм). В препа­рате свежевыделенного кала при температуре человеческого тела (на нагревательном столике) движения ее довольно активны, напоминают движения Е. histolytica, но при остывании препарата они быстро прекращаются. Прото­плазма, делящаяся на эндо- и эктоплазму, ни­когда не содержит эритроцитов, в ее вакуолях заметно лишь большое количество включенных микробов. Ядро в нативном препарате незаметно.

Цисты круглой или чаще овальной формы размером 8-16X6-8 мкм содержат 1-4 ядра. Как в не окрашенном, так и в окрашен­ном йодом препарате их трудно отличить от мелких цист дизентерийной амебы.

Jodamoeba butschlii - непатогенная амеба размером от 8 до 20 мкм. Движения медленные, быстро прекращающиеся при остывании препа­рата,- Псевдоподии образуются из эктоплазмы; эндоплазма зернистая, ее вакуоли содержат бактерии, крахмал и другие частицы, но никогда в них нет эритроцитов. В неокрашенных препа­ратах ядро обычно незаметно, при окраске гема­токсилином оно довольно большого размера с тонкой оболочкой и большой кариосомой. По­следняя лежит в центре ядра, занимая примерно половину его, и окружена светлой зоной.

Более характерными особенностями отли­чаются цисты этой амебы. Они имеют различную, часто неправильную форму, довольно толстую двухконтурную оболочку и, как правило, одно ядро. Наиболее характерен их вид при окраске раствором Люголя. На фоне зеленовато-желтой протоплазмы резко выступает ясно контурированная большая гликогеновая вакуоль, интенсивно окрашенная в красновато-коричневый цвет. Она занимает около половины протоплазмы. Изредка гликогеновых вакуолей бывает 2 или 3.

Класс жгутиковых (Flagellata).

Lamblia intestinalis.

Лямблии, как и описываемые ниже трихомонады, относятся к классу жгутиковых. Общей особенностью последних является нали­чие на поверхности тела одного или нескольких жгутиков, с помощью которых они передвигаются. В отличие от амеб тело жгутиковых покрыто оболочкой, наличие которой обусловли­вает постоянство их формы.

На окрашенных препаратах выявляется довольно сложное внутреннее строение лямблий. Они полностью билатерально симметричны. Посередине тела по его длине проходят два параллельных нитевидных опорных образова­ния - аксостили. По обе стороны от них сим­метрично расположены 2 ядра и 4 пары блефаробластов - точечных телец, от которых отходит такое же число жгутиков. Имеется только одно непарное образование - парабазальное тело, отходящее в форме запятой от середины аксо- стиля; назначение его неизвестно.

При исследовании кала наиболее важно уметь обнаружить и отличить цисты лямблий, обнаружение которых позволяет нередко поста­вить диагноз лямблиоза без дуоденального зондирования. В нативном препарате цисты лямблий выглядят овальными, реже круглыми, бесцветными, светопреломляющими образова­ниями длиной 10-14 мкм с двухконтурной прозрачной оболочкой.

Более ясная картина получается при окраске раствором Люголя. В таком препарате ясно видны оболочка цисты, аксостиль, 2 или 4 ядра, лежащие у одного из полюсов, блефаробласты, жгутики. Все это образует сложный, но характер­ный рисунок.

Trichomonas hominis.

Chilomastix mesnili - непатогенный жгути­коносец, грушевидной формой тела напоминаю­щий трихомонады. Отличается от последних отсутствием ундулирующей перепонки, наличием спиральной борозды, проходящей через все тело от переднего конца к заднему. Жгутиков четыре, расположены они у переднего конца, три из них направлены кпереди и обусловливают быстрое вращательное движение простейшего, и один жгутик лежит вдоль ротового отверстия. По­следнее находится в переднем конце и по длине равно 1/3-1/2 тела. Длина Chilomastix mesnili 13-24 мкм, ширина 6-10 мкм. На окрашен­ном препарате видно круглое ядро, расположен­ное в передней части тела, с несколькими зернами хроматина и одной кариосомой. В прото­плазме много пищевых вакуолей, наполненных бактериями. Аксостиля нет. Цисты формой напоминают лимон размером 7-9 X 5-6 мкм. В окрашенных йодом цистах видны одно ядро, извивающийся жгутиковый аппарат и фибрил­лы, окаймляющие цнтостом.

Класс ресничных (Ciliata).

Balantidium coli.

В. coli образует цисты сферической формы диаметром 50-60 мкм. Они покрыты бесцветной двухконтурной оболочкой. В окрашенных препа­ратах у них виден макронуклеус и одна сократи­тельная вакуоль (нефункционирующая).

Класс споровиков (Sporozoa).

Blastocystis hominis. В кале нередко встречается образо­вание, похожее на цисты простейших и могу­щее быть принято за них. Это бластомицет (гриб) Blastocystis hominis. Он обнаруживается чаще в жидком, чем нормальном, кале, но явля­ется, по-видимому, безвредным обитателем кишечника, Бластоцисты легко отличить от цист простейших при окраске йодом. Они имеют почти правильную круглую форму, различную величину - от 5 до 30 мкм в диаметре. Вся центральная часть их тела занята большой вакуолью - гомогенной, круглой, не окраши­вающейся йодом. Протоплазма оттеснена к пе­риферии и окружает вакуоль тонким слоем в виде кольца.

Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Меньшиков В.В. М.: Медицина, - 1987 год - 368 с.

• круглые черви или нематоды (Ришта, Аскариды, Трихинеллы);
• сосальщики или трематоды (Печеночные сосальщики, Шистосомы, Ланцетовидные двуустки);
• ленточные черви или цестоды (Фасциолопсис, Свиной и Бычий цепни).

В случае положительного ответа в бланке результатов расшифровывают какие именно патогенные микроорганизмы обнаружены. Самыми опасными являются следующие простейшие (выглядят как одноклеточные организмы, видны только под микроскопом):

Патогенные простейшие попадают в организм при контакте с носителем, а также вместе с зараженными продуктами или водой. В кале здорового человека не обнаруживаются.

Подготовка к анализу на яйца глистов и простейшие

Специальных манипуляций перед обследованием нет. Необходимо за 8–9 часов до сбора анализа прекратить прием пищи и ограничить прием жидкости. Также нужно за 2–3 дня прекратить прием слабительных препаратов и использование клизм.

Собирать кал необходимо в стерильную тару. Для этих целей можно использовать маленькую стеклянную или пластиковую банку (как от детского питания), но изначально ее нужно тщательно вымыть и обдать кипятком. Либо ее можно приобрести в любой аптеке. Аптечные контейнеры очень удобны, они уже стерильны, и к их крышке прикреплена специальная ложечка для удобного сбора материала. К емкости нужно прикрепить листок с фамилией, инициалами и датой взятия материала.

Сбор кала на яйца глистов и простейшие

• перед сбором фекалий следует помочиться, т. к. попадание мочи может существенно исказить результаты;
• акт дефекации проводится в сухой, чистый контейнер либо можно простелить в унитаз пакет или пленку.
• из полученной массы нужно взять примерно 1 столовую ложку;
• кал нужно брать небольшими порциями из разных мест (снаружи, изнутри);
• материал собирается в баночку, закрывается крышкой и в кратчайшие сроки доставляется в клинику для исследования.

Сбор кала на яйца глистов и простейшие у ребёнка

Вопрос «Как сдавать анализ кала?» может вызывать некоторые затруднения у родителей, имеющих детей до года, потому что сбор материала имеет свои особенности. Поэтому стоит придерживаться нескольких правил:

• Малыша необходимо положить на чистую пеленку или клеенку, сделать ему круговой массаж животика для стимуляции испражнений. Можно положить ребёнка на живот. Если дефекации все нет, то можно использовать газоотводную трубку. Использование клизмы или слабительных препаратов не рекомендовано.
• Собирать кал с одноразовых подгузников не желательно, но если другого выхода нет, то нужно собрать только слой, не касающийся подгузника. И следите, чтобы в кал ребёнка не попала моча.
• Жидкие каловые массы проще взять с многоразовой клеенки или при помощи мочеприемника.
• У ребёнка постарше материал взять проще. Для этого можно воспользоваться горшком. Он должен быть вымыт и обработан кипятком. Проводить обработку агрессивными моющими веществами не стоит.

Хранение кала для анализа на яйца глистов

Собранный материал правильно хранить в прохладном месте до 12 часов при температуре от +4 до +8 С в закрытой таре. Но не стоит забывать, что хранение может негативно сказаться на результатах исследований. В идеале его необходимо доставить на изучение не позднее чем через час после сбора.

Хранение кала для анализа на простейшие

Для определения живых микроорганизмов анализ необходимо делать не позднее 15–20 минут после сбора. Цисты живут дольше, поэтому их можно выявить даже спустя несколько часов, но не позднее чем через 24 часа. Хранить собранный материал необходимо в прохладном месте, в плотно закрытой таре.

Соскоб на энтеробиоз

Заражение яйцеглистом называется энтеробиоз. Оно характеризуется расстройствами кишечника и зудом вокруг анального отверстия также возможны аллергические реакции. Одновременно в кишечнике может проживать от десятка до нескольких тысяч особей. Заражение глистами происходит через грязные руки и при контакте с больным энтеробиозом.

Для обнаружения остриц анализа кала недостаточно, достоверность составляет всего 10–15%. Поэтому для диагностики энтеробиоза делается соскоб из анального отверстия. Вероятность обнаружения яиц остриц с помощью этого метода исследования составляет около 50%. В норме у здорового человека результат анализа должен быть отрицательным.

Подготовка к соскобу на энтеробиоз

Никаких специальных подготовок к обследованию не требуется. Соскоб делается утром сразу после сна, и главное условие - не проводить никаких водных процедур в области половых органов и не проводить акт дефекации, это позволит увеличить достоверность результатов. Противопоказанием может служить травмы кожного покрытия в области заднего прохода.

В связи с тем, что материал желательно доставить на исследование в течение двух часов, производить забор лучше в больнице или специализированной лаборатории.

Проведение соскоба на энтеробиоз

Существует три способа сбора анализа:

• соскоб палочкой в стерильный контейнер;
• соскоб на стекло шпателем;
• соскоб на стекло при помощи клейкой ленты.

В первом случае в аптеке необходимо приобрести пластиковую стерильную пробирку с крышкой, специальную длинную палочку с ватой на конце и глицерин либо физраствор. Смачиваете палочку в растворе, раздвигаете ягодицы и делаете несколько мазков вокруг анального отверстия слегка надавливая. Собранный материал помещаете в пробирку.

Во втором случае с помощью стерильного шпателя делаете соскоб со складок кожи и переносите на стекло, которое передается на анализ.

В третьем случае отсоединяете липкую ленту от стекла, стараясь не прикоснуться ни к ней, ни к стеклу. На несколько секунд прикладываете ленту к складкам заднего прохода и прилегающих участков. Затем наклеиваете обратно так, чтобы не образовалось пузырьков.

Если вы делаете соскоб на энтеробиоз дома, то можно использовать скотч и стерильное стеклышко, а на время транспортировки предметное стекло необходимо положить в стерильный контейнер.

Если во время сбора анализа обнаружены взрослые острицы (выглядят как маленькие белые червячки), то их опускают в 75% спиртовой раствор и также отправляют на исследование.

Хранение материала для анализа на энтеробиоз

Собранный материал нужно доставить на исследование в течение двух часов. Это позволит провести качественный анализ и получить верные результаты. В случае задержки, его можно хранить в прохладном месте в ой таре не более 8 часов. В таком случае результативность анализа заметно падает.

Результат анализа кала

Анализ кала на яйца глистов и простейших готовится от 1 до 6 дней. В норме результат должен быть отрицательным. Положительный результат показывает наличие гельминтов и простейших, а также содержит расшифровку их типов.

Соскоб на энтеробиоз готовится в течение одного дня. Результат будет либо положительным, либо отрицательным.

Получая анализы, не следует забывать что ложноположительных результатов не бывает, а отрицательный результат не гарантирует вам отсутствия глистов, и следует провести повторное исследование.